如何正確地使用培養(yǎng)基及**大程度地保持培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)，對(duì)每個(gè)培養(yǎng)者都很重要。培養(yǎng)基的使用依不同的培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)方式、細(xì)胞種類的不同而存在差異。細(xì)胞培養(yǎng)液的構(gòu)成細(xì)胞培養(yǎng)液指細(xì)胞生長(zhǎng)的液體環(huán)境，一般指完全培養(yǎng)液，添加了血清、水解乳蛋白、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液。細(xì)胞培養(yǎng)基&血清模式血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長(zhǎng)和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)是需要的，因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的全部營(yíng)養(yǎng)，如MEM培養(yǎng)基，較為常用的量為5％～10％的比例，而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3％左右，細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。細(xì)胞培養(yǎng)基&乳歐液模式化學(xué)合成培養(yǎng)基現(xiàn)雖已大規(guī)模使用，但在某些培養(yǎng)領(lǐng)域水解乳蛋白仍在使用，以補(bǔ)充培養(yǎng)液中缺乏的氨基酸、小肽物質(zhì)。較為常用的方式是用漢氏（Hanks’BSS）或歐式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白（一般為5‰濃度），即成乳漢（歐）液，再與化學(xué)合成培養(yǎng)基（一般為MEM）按比例混合使用（如1：1）。細(xì)胞培養(yǎng)基&各類添加劑（生長(zhǎng)因子等）模式成分復(fù)雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物，包括蛋白質(zhì)、多肽、核苷、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、**酸及脂類等。使用減血清培養(yǎng)基可以減少細(xì)胞培養(yǎng)中的血清干擾因素。寧夏基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)口

    3)擬南芥葉片愈傷**的誘導(dǎo)方法：用手術(shù)剪刀剪開長(zhǎng)勢(shì)良好的無(wú)菌葉片，用鑷子將其取出擺放在步驟(1)的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，使傷口接觸培養(yǎng)基；于溫度23-25℃、濕度50-70％、光照強(qiáng)度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照時(shí)間16h、黑暗時(shí)間8h)條件下培養(yǎng)。(4)擬南芥根愈傷**的誘導(dǎo)方法：用鑷子取出無(wú)菌苗的根，用手術(shù)剪刀剪開后平鋪于步驟(2)的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件同步驟(3)。(5)cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為：擬南芥葉片愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)6-8d在切口處出現(xiàn)顆粒狀愈傷**，培養(yǎng)24-26d獲得嫩綠色致密的團(tuán)塊狀愈傷**，顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％；擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)5-7d在切口處開始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**，培養(yǎng)20-22d獲得較大體積的淡黃色松脆型愈傷**，且在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛，顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％。如圖5所示。對(duì)比培養(yǎng)例5：將cs基本培養(yǎng)基替換為ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例5，ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為：擬南芥葉片愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)7-10d在切口處出現(xiàn)顆粒狀愈傷**，培養(yǎng)24-26d獲得嫩綠色致密的團(tuán)塊狀愈傷**，顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％。寧夏基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)口DMEM培養(yǎng)基在組織工程中有重要應(yīng)用。

    體外培養(yǎng)時(shí)，一定的濃度范圍條件下，葡萄糖主要經(jīng)糖酵解循環(huán)轉(zhuǎn)化成乳酸來(lái)為細(xì)胞提供能量。（氨基酸）氨基酸在細(xì)胞內(nèi)的重要生理作用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：①是蛋白質(zhì)的基本組成單位，用于合成蛋白質(zhì)和多肽；②可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物，如核酸、尼克酰胺等；③某些氨基酸還具有獨(dú)特的生理作用，如甘氨酸參與生物轉(zhuǎn)化作用，丙氨酸和谷氨酰胺參與細(xì)胞內(nèi)氨的運(yùn)輸?shù)龋虎芸赊D(zhuǎn)變成糖類和脂肪，參與氧化供能。細(xì)胞所能利用的氨基酸是L型同分異構(gòu)體，D型氨基酸不能被利用。不同的細(xì)胞對(duì)氨基酸的需求各異，但有些必需氨基酸是細(xì)胞不能自身合成的，必須依靠外源的細(xì)胞培養(yǎng)液提供。其余非必需氨基酸，細(xì)胞可以自己合成，或通過(guò)轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來(lái)，但是在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加適當(dāng)濃度的非必需氨基酸可以減輕細(xì)胞在合成方面的負(fù)擔(dān)，提高谷氨酰胺及其它必需氨基酸的利用率。絕大部分細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求，可能因其不僅是細(xì)胞的主要氮源，且可作為細(xì)胞生長(zhǎng)的能源物質(zhì)和嘌呤、嘧啶核苷酸的前體，另外還可直接作為細(xì)胞增殖和產(chǎn)物合成中的蛋白質(zhì)和多肽的組成成分。在缺少谷氨酰胺時(shí)，細(xì)胞會(huì)生長(zhǎng)不良，甚至死亡。由于谷氨酰胺具有多種生理作用。

    按每個(gè)2品牌：安捷倫型號(hào)：1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià)：20萬(wàn)-50萬(wàn)【原創(chuàng)】實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則我正在學(xué)習(xí)這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可很重要，有興趣的一起學(xué)習(xí)，同時(shí)希望得到高人指點(diǎn)品牌：安捷倫型號(hào)：1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià)：20萬(wàn)-50萬(wàn)【分享】微生物常識(shí)---第二講培養(yǎng)基制備技術(shù)一、玻璃器皿的清洗在制備培養(yǎng)基的過(guò)程中，首先要使用一些玻璃器皿，如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況，經(jīng)過(guò)一定的處理，洗刷干凈。有的還要進(jìn)行包裝，經(jīng)過(guò)**等準(zhǔn)備就緒后，才能使用。品牌：安捷倫型號(hào)：1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià)：20萬(wàn)-50萬(wàn)【資料】培養(yǎng)基制備、消毒與**檔.doc培養(yǎng)基制備、消毒與**檔.doc品牌：安捷倫型號(hào)：1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià)：20萬(wàn)-50萬(wàn)【求購(gòu)】找培養(yǎng)基制備指南的第二部分找培養(yǎng)基制備指南的第二部分好久了，都沒找到！有的能分享不？謝謝！品牌：安捷倫型號(hào)：1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià)：20萬(wàn)-50萬(wàn)IBS培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng)儀器簡(jiǎn)介：MEDIACLAVE是一臺(tái)專門用于培養(yǎng)基制備及**的設(shè)備，它快速**，功能齊全。配合MEDIAJET組成一個(gè)的培養(yǎng)基平皿分裝系統(tǒng)MEDIAJET是一臺(tái)設(shè)計(jì)緊湊、自動(dòng)化程度很高的平皿分裝器。無(wú)血清培養(yǎng)基適合于無(wú)血清環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。

    因?yàn)榻鈨鰰r(shí)可能會(huì)有營(yíng)養(yǎng)成份析出，影響培養(yǎng)效果。正常情況下于2~8℃避光保存，使用前從冰箱取出，放入室溫進(jìn)行平衡。通常的液體培養(yǎng)基有效期是6個(gè)月到12個(gè)月。液體細(xì)胞培養(yǎng)基盡量避免長(zhǎng)期貯存，其中的谷氨酰胺會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)而慢慢分解，如果細(xì)胞生長(zhǎng)不良，可考慮檢測(cè)培養(yǎng)基中的谷氨酰胺含量確定是否再補(bǔ)加谷氨酰胺。市售商業(yè)化液體細(xì)胞培養(yǎng)基有具體的有效期，對(duì)于使用干粉細(xì)胞培養(yǎng)基自行配制成液體以后，也應(yīng)低溫（2~8℃）貯存。除培養(yǎng)基中如谷氨酰胺易降解之外，培養(yǎng)基中的其他成份隨著溫度的升高也可能會(huì)發(fā)生降解或是析出。5.細(xì)胞培養(yǎng)基使用過(guò)程中常見問題分析由于大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH為，偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不完全相同，原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受力差，無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。因此，原代培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中的緩沖系統(tǒng)就顯得較為重要。一般的細(xì)胞培養(yǎng)基采用的都是平衡鹽系統(tǒng)，但不同的培養(yǎng)基或是同一系列的培養(yǎng)基所用平衡鹽系統(tǒng)不同，如199系列、MEM系列均有Hanks’系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle’s系統(tǒng)的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基不是上述常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng)，例如RPMI1640培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基。F12培養(yǎng)基常用于神經(jīng)細(xì)胞和其他敏感細(xì)胞系。寧夏基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)口

減血清培養(yǎng)基減少了實(shí)驗(yàn)中的血清干擾。寧夏基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)口

    從而使培養(yǎng)基的預(yù)熱、加熱**及冷卻過(guò)程可在同一設(shè)備內(nèi)完成。該流程的加熱和冷卻時(shí)間比噴射加熱連續(xù)**流程要長(zhǎng)些，但由于在培養(yǎng)基的預(yù)熱過(guò)程同時(shí)也起到了**后培養(yǎng)基的冷卻，因而節(jié)約了蒸汽和冷卻水的用量。（2）蒸汽直接噴射型的連續(xù)**系統(tǒng)流程中采用了蒸汽噴射器，它使培養(yǎng)液與高溫蒸汽直接接觸，從而在短時(shí)間內(nèi)可將培養(yǎng)液急速升溫至預(yù)定的**溫度然后在該溫度下維持一段時(shí)間**，**后的培養(yǎng)基通過(guò)一膨脹閥進(jìn)入真空冷卻器急速冷卻，從圖中可以看出，由于該流程中培養(yǎng)基受熱時(shí)間短，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失也就不很嚴(yán)重，同時(shí)該流程保證了培養(yǎng)基物料**先出，避免了過(guò)熱或**不徹底等現(xiàn)象。（3）由連消塔、維持罐和噴淋冷卻組成的**系統(tǒng)連續(xù)**的基本設(shè)備一般包括：①配料預(yù)熱罐，將配制好的料液預(yù)熱到60-70℃，以避免連續(xù)**時(shí)由于料液與蒸汽溫度過(guò)大而產(chǎn)生水汽撞擊聲；②連消塔，連消塔的作用主要是使高溫蒸汽與料液迅速接觸混和，并使料液的溫度很快升高到**溫度（126-132）℃；③維持罐，連消塔加熱的時(shí)間很短，光靠這段時(shí)間的**是不夠的，維持罐的作用是使料液在**溫度下保持5-7min，以達(dá)到**的目的；④冷卻管，從維持罐出來(lái)的料液要經(jīng)過(guò)冷卻排管進(jìn)行冷卻。寧夏基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)口